Corning® Transwell小室产品选择指南

2019-09-19 14:05:46 admin 17

Corning® Transwell小室

产品选择指南

之前给大家介绍过康宁Transwell小室,小小身材大大用途,但培养的细胞多样,模型多样,目的不同,该如何选择才能发挥小室的最大作用呢?


选择孔径

要选择合适的Transwell小室孔径,首先要明确构建出的3D细胞培养模型是否涉及到细胞穿膜。一般来说,共培养试验及构建细胞极化模型等不需要细胞穿膜,大多选择0.4μm或1.0μm的小孔径产品。而像是细胞迁移及侵袭这类实验,则需要选择较大孔径的产品。

下表为常见应用和细胞种类的产品推荐孔径,仅供参考,对于一些要求严格的实验,预实验就必不可少啦~


材质挑选

Corning品牌Transwell小室有聚碳酸酯(PC),聚酯(PET)以及聚四氟乙烯(PTFE)三种膜材质。


PC和PET膜材质应用都很广泛,二者的主要区别在光透性方面。PC膜为半透明,不太方便在培养的过程中观察上室细胞的形态;PET膜透明,方便在相差显微镜下观察细胞的状态。

另外,在0.4um孔径下,PC膜和PET膜的孔密度(单位面积上的孔数量)不同,PC膜提供更高的膜孔密度。

您可根据对实验的要求(是否需要观察细胞状态,是否需要更高孔密度的膜)来选择。


与PC、PET膜相比,PTFE膜是使用较少的一种材质。PTFE膜的Transwell-COL小室包被有等摩尔数混合的I型和III型牛胎盘胶原,可以促进细胞的贴附和伸展,容许细胞在培养状态下(湿润后)观察。


此外,PC、PET膜上的孔均为蚀刻的小孔,有着额定的孔密度,在镜下可以观察到。而PTFE膜上的孔为拉伸形成,在三类膜中只有胶原包被的PTFE膜没有确定的孔密度,因为PTFE膜为拉伸形成,是具有曲折孔道的膜。


细胞贴壁说明

未包被的小室膜材质(PC或PET)虽与普通塑料细胞培养皿/瓶的材质(PS)不同,但膜的两侧均经过组织培养表面处理( TissueCulture Treated, TC Treated),与一般做细胞培养的PS耗材的表面处理相同。因此,在正常情况下,细胞在小室内的贴壁情况应与培养皿/瓶中类似。在普通培养时需包被基质蛋白等辅助贴壁的细胞,在小室上仍然需要包被。包被方法类似普通培养表面,可通过小室膜表面积换算所需包被液的量,具体可见康宁相关操作说明示例。


除了Collagen包被的PTFE小室,康宁同时提供多种预包被基质蛋白的PET膜小室产品,详情请见目录。


接种细胞加样顺序

一般先将预热的培养基加入多孔板的孔中(下室),再轻轻将小室放入孔中。在放入时,建议将小室稍稍倾斜,一侧先接触液面,以免垂直放入在小室下生成气泡。之后便可将混合均匀的细胞悬液加入小室内部。


小室的上下室加液推荐量

小室的上下室加液后液面基本相平,以下为推荐加液体积


To be continued
未完待续





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